Metode de Transfer al Genelor

Transferul direct:

Transformarea mediată de PEG

Electroporarea

Transferul ADN via un purtător:

Bombardamentul cu microparticule

Transferul ADN via un vector:

Agrobacterium, virusuri

Succesul aplicării metodei depinde de:

regenerarea plantelor din protoplaşti;

sisteme eficiente de selecţie a celulelor transformate.

Transferul genelor prin electroporare

sau PEG este simplu şi eficient:

permite manipularea unui număr mare de celule;

pot fi obţinute mii de plante într-un experiment (sistemul model protoplaştii de tutun);

nu necesită echipamente speciale.

Frecvent se integrează copii multiple şi se produc rearanjamente

Integrarea se face la întâmplare

Nu exista tehnici eficiente de regenerare din protoplaşti la multe plante de cultură

Concentraţia ionilor de Ca şi de Mg în amestecul de incubare

Concentraţia ADN

Utilizarea unui ADN purtător inert

Greutatea moleculară şi concentraţia PEG

Raportul ADN/protoplaşti

Durata şi numărul impulsurilor electrice

Tensiunea folosită(200 - 600v)

Mediul utilizat

Concentraţia ADN plasmidial (1-10mg/ml)

Densitatea protoplaştilor

Dimensiunile şi configuraţia plasmidei (moleculele de ADN plasmidial lineare se integrează mai eficient decât ADN superrăsucit)