Metodă rapidă HPLC pentru determinarea rezveratrolului din vin

Resveratrolul (trans3,5,4-trihidroxistilben) este o fitoalexina asociata cu rezistenta vitei de vie la putregaiul cenusiu si este produs de boabele de struguri sub influenta radiatiilor UV. Sinteza resveratrolului a fost localizata in pielita bobului, ceea ce indica ca rezistenta principala a strugurilor la atacul de putregai are loc la acest nivel.

Importanta resveratrolului deriva din trei domenii de interes: • oenologic – este un nou compus fenolic, provenit din struguri, care participa la culoare, la caracterul gustativ, la invechirea vinului, intervine in reactiile de oxidare, interactioneaza cu proteinele. • fitopatologic - mijloc de protectie impotriva organismelor fitopatogene prin stimularea apararii naturale a plantei; • farmacologic – face parte din compusii cu proprietati antioxidante sau captatori de radicali liberi in organism; protector impotriva bolilor cardiovasculare; proprietati chimiopreventive impotriva cancerului; previne inflamatiile asociate cu artrita si reumatismul; creste cantitatea de colesterol„bun”(HDL) si scade pe cel „ rau”(LDL).

Dezvoltarea ciupercii este favorizata de anumiti factori externi: umiditatea, temperatura, tesuturile moarte, leziunile plantelor, lumina .  Studiile au evidentiat anumite reactii pe care le produce ciuperca musafir.  Ipoteza acumularii rapide a compusilor antifungici – resveratrol, resveratrol trans- de- hidrodimer şi ε - viniferina – in vita de vie dupa infectia cu Botrytis cinerea, a fost pusa pe seama latentei acesteia.  Biosinteza stilbenilor, flavonoizilor şi taninurilor, decurge din metabolismul secundar al aminoacizilor – metabolizarea L- fenil alaninei in acid cumaric.  Calea de biosinteza a flavonoizilor la care participa fenilalanina, un aminoacid aflat in cantitati mari in toate tesuturile in prezenta enzimei stilbensintaza sufera o deviere cu formare de resveratrol.(fig.2) Metoda de separare prin HPLC  Extractele obţinute din prelucrarea probelor de struguri şi vin au fost injectate în coloană de trei ori.  Conditii de lucru :  Coloana Nucleosil-C18 250 mm x 4,6 mm ;debit 1 ml/minut  Elutie: Sistem gradient = 2 solventi :  A – apa  B - acetonitril  H2O / CH3 CN 2:8 (v/v) Volumul injectat : 20μl  Analiza compuşilor fenolici din struguri din soiurile Pinot noir, Fetească neagră, Merlot, Cabernet Sauvignon s-a efectuat la două momente în timpul maturării.  Soiurile luate în studiu au prezentat valori diferite ale suprafeţei picurilor.