Determinarea Activității Antioxidante prin Utilizarea radical-cationului

1. Consideratii teoretice

Radicalul ABTS reprezinta o particula activa oxidanta, care in studiul analitic prezinta o metoda de determinare a cantitatii de antioxidanti.

Metoda utilizarii cation-radicalului ABTSo+, capacitatea antioxidanta este definita drept valoarea diferentei dintre absorbanta solutiei acestui cation-radical (?=734 nm) la t = 0 min si t = 1 min si impartita la absorbanta solutiei initiale. Corectia se face dupa solutia martor (in loc de andioxidant se adauga apa distilata). Deci, activitatea antioxidanta totala (AAT) va fi determinata conform ecuatiei :

AAT =

unde T0a si T1a sunt absorbantele solutiei la 0 si la 1 min respectiv a probei testatel, si T0b si T1b sunt absorbantele solutiei probei martor la 0 si 1 min. Pentru activitatea antioxidanta totala a fost determinata curba de calibrare dupa Trolox (Tx). In asa mod este calculata capacitatea antioxidanta in echivalenti Trolox (TEAC).

Partea experimentala;

Conditii:

- Solutia de ABTSo+ cu absorbanta ? 0,7

- [ADHF?] - 1 x 10-3 M

- [C2H5OH]- 70 %

Prepararea solutiilor de lucru:

Reactivi Prepararea

ABTS Se dilueaza 10 ml sol. initiala ABTS cu 70 ml apa distilata, pentru a obtine absorbanta 0,712.

Acid Ascorbic Se dizolva 0,088 g de acid ascorbic in 50 ml apa distilata. Se va obtine sol. cu concentratia 0,001 mol/l.

Etanol 70% 364 ml de C2H5OH de 96% se dizolva in 500 ml de apa dist.-> [C2H5OH]=70%

Curba de etalonare, folosind reactivul Trolox

Pentru determinarea activitatatii antioxidante totale se procedeaza conform:

Intr-o cuva cu l=1 cm se ia 3 ml de ABTSo+ si 30 ul Acid ascorbic (2?10-4M)

Se masoara absorbanta la ?=750 nm la t = 0 min si t = 1 min si datele obtinute se introduc in tabel: