Separarea cromatografică pe strat subțire a unui amestec de coloranți

Scopul lucrarii:

Lucrarea are ca scop alegerea unui solvent (sau a unui amestec de solventi) de elutie corespunzator pentru a realiza o separare cromatografica cat mai buna a unui amestec de coloranti care contine rosu de metil, ±-nitrozo-²-naftol si albastru de metilen.Alegerea eluantului respectiv se va face pe baza valorilor Rf calculate pentru fiecare component din amestec, conditiile experimentale date, cunoscand ca o buna separare cromatografica este caracterizata de valori Rf cuprinse intre 0.05 si 0.85 (pentru componentii respectivi) si de o diferenta intre valorile Rf pentru doi componenti ”Rf e0.05.Aceste valori corespund unei repartitii uniforme a componentilor separati pe suprafata placii cromatografice.

Aparatura si reactivi:

- camere de developare paralelipipedice;

- placi (sau folie) cromatografice cu strat de silicagel;

- solutie apoasa dintr-un amestec de coloranti ce contine rosu de metil, ±-nitrozo-²-naftol si albastru de metilen;

- solventi de elutie cu diferite polaritati

eter de petrol

benzen

acetat de etil

alcool metilic

apa distilata

- micropipeta pentru depunerea probei pe placa fotografica

- cilindrii gradati pentru masurarea volumelor de solventi de elutie;

Modul de lucru:

Se introduce amestecul eluant in tancul cromatografic pana se umple pe o distanta de cca 5 mm. Din inaltime si se lasa cca 30 min. pentru saturarea camerei de developare cu vaporii solventului.

Pe placa fotografica se apica cu ajutorul micropipetei sau cu o capilara de sticla o picatura din amestecul de coloranti ce urmeaza ce a fi seprati, la cca 0.5-1 cm de partea inferioara a placii, astfel incat prin introducerea cromatoplacii in tancul de developare spotul sa fie situat la cca 2-3 mm deasupra nivelului solventului aflat in tanc (proba va fi astfel preluata de solventul de elutie prin fenomenul de capilaritate).Se traseaza pe placa linia de start (pe care a fost depus spotul probei)si se intoarce apoi in camera de developare, lasand solventul sa migreze pana aproape de capatul superior al placutei.Dupa terminarea elutiei se scate placa din camera de developare si se marcheaza frontul de solvent (linia de front).